共價結合型果膠(CSP)含量試劑盒說明書
微量法 100管/48樣
正式測定前取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義：
果膠是構成細胞初生壁和中膠層的主要成分，主要由原果膠、果膠酸甲酯和果膠酸組成。果膠中含有半乳糖醛酸、乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸等，是許多高等植物細胞壁中含量最豐富的多糖成分，其獨特的物理、化學性質影響著植物源食品的口感和品質。果膠間以Ca2+橋及其他離子鍵、氫鍵、糖苷鍵、酯鍵和苯環偶聯的方式交聯，通過不同的抽提方法可以提取各種形式的果膠，如水溶性果膠（WSP）、離子結合型果膠（ISP）和共價結合果膠（CSP）。
測定原理：
利用帶有螯合劑的堿溶液提取共價結合型果膠（CSP），采用咔唑比色法測定果膠含量。果膠水解成半乳糖醛酸，在硫酸溶液中與咔唑試劑進行縮合反應，生成物質在530 nm處有最大吸收峰。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、80％乙醇、丙酮、濃硫酸（不允許快遞）、研缽和蒸餾水。
試劑的組成和配制：
試劑一：液體100mL× 1瓶，4℃保存。
試劑二：液體100mL× 1瓶，4℃保存。
試劑三：標準液1mL× 1支，4℃保存。
試劑四：液體5mL× 1瓶，4℃保存；
樣品的前處理：
測定步驟：
1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上，調節波長至530nm處，蒸餾水調零；試劑三和試劑四37℃預熱10min以上；
2、操作表：
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試劑名稱（μL） |
空白管 |
標準管 |
對照管 |
測定管 |
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待測樣本 |
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50 |
50 |
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試劑三 |
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50 |
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蒸餾水 |
50 |
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50 |
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試劑四 |
50 |
50 |
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50 |
混勻
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濃硫酸 |
400 |
400 |
400 |
400 |
混勻，95℃水浴5min后，冷卻至室溫，取200μL 至微量石英比色皿或96孔板中，530nm處讀取吸光值，空白管、標準管、對照管和測定管吸光值分別記為A1、A2、A3和A4。若A大于2，需將待測樣本用蒸餾水稀釋（可稀釋10倍或20倍）?？瞻坠芎蜆藴使苤灰鲆还?，每個測定管需設一個對照管。
CSP含量計算：
CSP含量(mg /g 干重)= (C標準×V1) ×(A4-A3)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2) ×稀釋倍數=0.05×(A4-A3)÷(A2-A1)÷W×稀釋倍數
C標準：標準管濃度，0.05mg/mL；V1：加入樣本體積，0.1mL；V2：加入提取液體積，1mL； W：樣本干重，g。
注意：最低檢測限為50μg /g 干重
掃描二維碼
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資料/datasheet
